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動態(tài)顯色法鱟試劑在操作過程中要注意以下幾點

發(fā)布時間: 2022-12-19  點擊次數(shù): 722次
  動態(tài)顯色法鱟試劑兼有動態(tài)濁度法鱟試劑和終點法顯色基質(zhì)鱟試劑的優(yōu)點。不需要凝固蛋白原形成凝膠,根據(jù)顯色反應(yīng)來準(zhǔn)確定量細菌內(nèi)毒素,抗干擾能力強,特別適用于生物樣本的檢測,如疫苗、抗體、蛋白質(zhì)、核酸、臨床樣本等的內(nèi)毒素分析。
  
  動態(tài)顯色法鱟試劑的質(zhì)量主要表現(xiàn)于其靈敏度、自凝時間與成膠狀態(tài)三個方面:靈敏度穩(wěn)定;自凝時間不低于24h;具有一定的緩沖能力與合適的pH;反應(yīng)后即形成堅實凝膠,將成膠安瓿翻轉(zhuǎn)180°而不會被破壞。而質(zhì)量稍差的鱟試劑存放一定時間后(如半年)其靈敏度可能發(fā)生變化,而靈敏度的改變會使測定結(jié)果所反映的供試品中內(nèi)毒素的允許限值發(fā)生變化。
 
  

動態(tài)顯色法鱟試劑

 
 

  動態(tài)顯色法鱟試劑在操作過程中要注意以下幾點:
  
  1、實驗室要求潔凈、無塵埃流通;檢驗人員同時注意衛(wèi)生的保持。在整個使用操作過程中應(yīng)防止微生物的污染,例如空氣的流動,人員的口沫、汗液污染等。
  
  2、鱟試劑開啟、溶解和配制時應(yīng)盡量避免將安瓿外瓶壁臟物、瓶壁碎片、砂輪鋸屑等異物混入鱟試劑中,避免鱟試劑外損。
  
  3、鱟試劑中含有多種蛋白質(zhì),用力振搖會產(chǎn)生氣泡,一旦起泡難以消除,而影響檢測的準(zhǔn)確性,所以在整個操作過程中都要輕力以避免因過分震動而引起的誤差。
  
  4、量取和加樣反應(yīng)物時,一定要加到試管底部接近鱟試液而不接觸鱟試液的管壁處。
  
  5、生成凝膠的最適pH值為6~8,對于氯化鈉注射液、葡萄糖注射液(5%,10%)等注射液,不需考慮供試液的pH值,而檢查其他制劑時,尤其是一些本身緩沖能力較強或偏酸、堿的供試品,應(yīng)考慮供試品的pH值。
  
  6、使用時要嚴(yán)格控制溫度和時間。當(dāng)鱟試劑一加入內(nèi)毒素及樣品混合液中時反應(yīng)已開始,并在一定的溫度范圍內(nèi),反應(yīng)溫度越高,反應(yīng)速率越大;保溫時間的增長,也會提高鱟試劑的靈敏度,增加假陽性的發(fā)生,導(dǎo)致較大誤差。因此,要注意控制溫度的變化和保溫時間。
  
  7、保持實驗器具的潔凈。每次檢驗完畢,應(yīng)及時將玻璃器具充分清洗后于250℃干熱滅菌處理,待烤箱溫度升至設(shè)定的溫度后開始計時,干烤至少1h。也可用其他經(jīng)確證不干擾細菌內(nèi)毒素的檢查的適宜方法。對于塑料、橡膠等不耐熱器材可用30%雙氧水浸泡4h,用無熱原水沖洗,70℃干燥備用。
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