上期文章我們深入探討了熱原與細(xì)菌內(nèi)毒素檢測從取樣到處理的詳盡流程，本期文章繼續(xù)揭開質(zhì)量控制領(lǐng)域的神秘面紗。第二期將聚焦于檢測方法的靈活性探討、轉(zhuǎn)換流程的優(yōu)化策略，以及細(xì)菌內(nèi)毒素限值設(shè)定的最新動態(tài)，為您呈現(xiàn)更多關(guān)于這一關(guān)鍵質(zhì)量控制環(huán)節(jié)的深度解析。

Q1：對于藥典收載的產(chǎn)品，制藥公司是否可以采用替代測試方法？

可以。如果制藥公司提供方法的準(zhǔn)確度、靈敏度、精密度、選擇性或者適用性，在自動化或者計算機(jī)數(shù)據(jù)簡化、和其他特殊環(huán)境下具有優(yōu)勢，制藥公司可以采用替代方法或者規(guī)程。這樣的替代方法或者規(guī)程應(yīng)該根據(jù)USP通則<1225>“藥典方法驗證"的要求來驗證，并且應(yīng)該證實具有等效效果或者更好的分析效果。在出現(xiàn)差異或爭議時，除非在藥品專論中另有說明，否則最終結(jié)論應(yīng)該基于USP藥典凝膠法來得出。

下面是替代測試的例子。

1. 單核細(xì)胞激活類型熱原測試

有必要進(jìn)行產(chǎn)品專屬性驗證以確認(rèn)特定測試物質(zhì)或物料是否適用于單核細(xì)胞激活方法是合適的。驗證應(yīng)該包括，但是不限于干擾測試、單個測試樣品的熱原準(zhǔn)確度測試；對于醫(yī)療器械，測試系統(tǒng)和單核細(xì)胞直接相關(guān)的能力。

2. 使用重組試劑的細(xì)菌內(nèi)毒素測試

在2024年7月26日，美國藥典（USP）微生物專家委員會正式宣布，將第<86>章“使用重組試劑的細(xì)菌內(nèi)毒素測試"納入《美國藥典-國家處方集》（USP-NF）。該章節(jié)的最終文本預(yù)計將于2024年11月公布，以供行業(yè)提前采用，并定于2025年5月正式生效。

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Q2：當(dāng)從一種細(xì)菌內(nèi)毒素測試轉(zhuǎn)換為另外一種方法時，最-好-的流程是什么?

測試相同實體（例如LAL系列）的測試方法的轉(zhuǎn)換可以通過比較這2種測試方法來證實新方法的等效性?；A(chǔ)工作是比較檢測限度和抑制/增強(qiáng)能力。新方法的靈敏度可以通過加入產(chǎn)品樣品來評估。另外在使用插標(biāo)法時，一連串的產(chǎn)品局部樣品被發(fā)現(xiàn)顯示陽性可能對于比較這個方法的結(jié)果來說是好的源頭。分析方法驗證應(yīng)該試圖說明方法正常使用中和制造環(huán)境中發(fā)現(xiàn)的變異性（例如原始物料或者季節(jié)變化）。

對于藥品，獸藥和生物制品而言，應(yīng)該在PAS（優(yōu)先批準(zhǔn)補(bǔ)充）中遞交新方法的轉(zhuǎn)換資料?；蛘?，若公司已建立方法轉(zhuǎn)換的一般規(guī)程，也可選擇通過PAS-CP（比較方案）提交資料以供審核。比較方案應(yīng)該詳細(xì)描述用于建立新方法等效性方法使用的檢測和標(biāo)準(zhǔn)。比較方案批準(zhǔn)后，方案實施結(jié)果可按減少的報告類別的程序直接報告（補(bǔ)充-正在實施的變更或年度報告或特別報告21 CFR 314.80）。公司應(yīng)該保存研究方案、最終報告和所有數(shù)據(jù)以便FDA審核。在遞交比較方案之前，公司應(yīng)與正確的審查部門確認(rèn)申報流程。

對于3類醫(yī)療器械，過渡到新的檢測方法需要根據(jù) 21CFR 814.39（e）提交30天的通知。具體要求參見FDA's guidance,Modifications to Devices Subject to Premarket Approval （PMA）-The PMA Supplement Decision-Making Process.

對于1類和2類醫(yī)療器械的制造變更，應(yīng)該根據(jù)質(zhì)量體系法規(guī)和21 CFR 820進(jìn)行。設(shè)計控制、生產(chǎn)和過程控制要求見21 CFR 820.30、21CFR 820.70、21 CFR 820.72 和21 CFR 820.75。

對于醫(yī)療器械的質(zhì)量控制測試，包括入廠部件、原材料、中間產(chǎn)品、成品以及非無菌樣品滅菌前的最終產(chǎn)品熱原測試，則需要提前30天通知。醫(yī)療器械制造商應(yīng)證明其靈敏度與器械的給藥途徑和身體接觸類型相一致。在證明方法與USP參考標(biāo)準(zhǔn)之間具有可重復(fù)的相關(guān)性后，制造商可以使用另一種細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法。

Q3：1987指南中附錄E中細(xì)菌內(nèi)毒素限值發(fā)生了什么變化?

自1987 年《指南》發(fā)布以來，由于劑量和藥品規(guī)格的大量增加，細(xì)菌內(nèi)毒素限值表已經(jīng)過時。確定細(xì)菌內(nèi)毒素限值的適當(dāng)方法是使用USP或AAMI標(biāo)準(zhǔn)中提供的計算方法。藥典各論中的限值也可能沒有考慮到當(dāng)前的產(chǎn)品規(guī)格或者劑量，也應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)中建議的計算方法對其進(jìn)行檢查。

如果成品中含有多種成分，則無論單個成分的細(xì)菌內(nèi)毒素限值如何，腸外給藥產(chǎn)品的總細(xì)菌內(nèi)毒素限值不應(yīng)超過USP<85>細(xì)菌內(nèi)毒素測試中規(guī)定的總限值。鞘內(nèi)給藥產(chǎn)品、眼藥產(chǎn)品或醫(yī)療器械（有關(guān)器械，請參閱問題11）的細(xì)菌內(nèi)毒素限值要求可能不以腸外給藥產(chǎn)品的計算方法為基礎(chǔ)。FDA建議企業(yè)向有關(guān)辦公室或?qū)彶椴块T來核實討論這些產(chǎn)品的細(xì)菌內(nèi)毒素。

Q4：如何采用QbD概念支持細(xì)菌內(nèi)毒素限值?

當(dāng)實施QbD（Quality by Design）“質(zhì)量源于設(shè)計"概念時，細(xì)菌內(nèi)毒素測試的策略應(yīng)該基于產(chǎn)品和工藝?yán)斫猓⒔Y(jié)合風(fēng)險管理來確保最終產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定如一。應(yīng)該采用恰當(dāng)?shù)闹锌販y試來評估可能受到細(xì)菌內(nèi)毒素形成或者侵入風(fēng)險的生產(chǎn)過程區(qū)域，很多公司已經(jīng)具備相關(guān)項目來監(jiān)控購入的物料和組分,包括工藝用水的細(xì)菌內(nèi)毒素污染。

當(dāng)確定每個制造階段中控測試限值時，應(yīng)該考慮最終成品的放行標(biāo)準(zhǔn)。為了評估產(chǎn)品污染的相對風(fēng)險，定量檢測可能優(yōu)于限值檢測，以促進(jìn)產(chǎn)品質(zhì)量趨勢，并在細(xì)菌內(nèi)毒素超過標(biāo)準(zhǔn)和導(dǎo)致產(chǎn)品不合格之前發(fā)現(xiàn)和糾正偏離情況。

細(xì)菌內(nèi)毒素限值應(yīng)視具體情況而定，并將作為每份相關(guān)上市申請或補(bǔ)充材料的一部分進(jìn)行評估。

無論是替代測試方法的驗證、檢測方法的轉(zhuǎn)換流程，還是內(nèi)毒素限值的科學(xué)設(shè)定，都離不開對產(chǎn)品特性和工藝流程的深刻理解。這一系列的探討不僅加深了我們對熱原與細(xì)菌內(nèi)毒素檢測的理解，更為制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供了寶貴的實踐指導(dǎo)。更多前沿知識、最新法規(guī)解讀及案例分析將在后續(xù)文章中逐一呈現(xiàn)，敬請期待后續(xù)精彩內(nèi)容！