熱原(pyrogen)指在臨床上能使哺乳動(dòng)物產(chǎn)生熱原反應(yīng)的物質(zhì)。關(guān)于熱原的定義在學(xué)術(shù)上尚有爭(zhēng)論。熱原是否就是內(nèi)毒素在學(xué)術(shù)上也有爭(zhēng)議。但在藥檢的范疇,可以說無內(nèi)毒素就是無熱原,檢測(cè)內(nèi)毒素就是檢測(cè)熱原。
隨著科學(xué)的進(jìn)步,通過對(duì)鱟血液細(xì)胞溶解物及內(nèi)毒素的深入研究發(fā)現(xiàn),鱟血液細(xì)胞的溶解物包含了與內(nèi)毒素反應(yīng)所需的全部凝集因子,它們與內(nèi)毒素的反應(yīng)是一種復(fù)雜的酶促反應(yīng)。
1964年,Bang和Levin首先提出鱟血凝集的初步機(jī)制,并用鱟試驗(yàn)檢測(cè)內(nèi)毒素。1968年,Marchalon精制成功鱟試劑,此后鱟試劑作為一種檢測(cè)內(nèi)毒素血癥的簡(jiǎn)便而靈敏的方法逐步推廣于臨床。
從上文鱟試劑(包含有凝固酶原及凝固蛋白原)與內(nèi)毒素的反應(yīng)機(jī)制可以看出,這種凝集反應(yīng)是一系列復(fù)雜的酶促反應(yīng),任何因素影響到反應(yīng)的任一過程的正常進(jìn)行,都會(huì)影響到檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性,即出現(xiàn)所謂“假陰性"或“假陽性"的結(jié)果。通常的影響因素有pH值、離子濃度以及某些干擾成分。只有證實(shí)檢品對(duì)凝集反應(yīng)無干擾之后,檢查的結(jié)果才是可信的。
最初人們以為鱟試劑是專一對(duì)內(nèi)毒素反應(yīng)的試劑。隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)鱟試劑除了含有能被內(nèi)毒素激活的凝集因子外,還存在著能被其他物質(zhì)激活的G因子?;罨?/span>G因子同樣可以激活凝固酶原,從中可以看出,鱟試劑存在“旁路"激活路線。通常稱由“旁路"反應(yīng)而致的陽性結(jié)果為細(xì)菌內(nèi)毒素的“假陽性"。
近期的研究證實(shí),(1,3)-β-葡聚糖類物質(zhì)(如真菌多糖)能激活益試劑的旁路。此外,1981年在美國(guó)的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品及鱟試劑應(yīng)用國(guó)際會(huì)議上,Carson等提出了一個(gè)“鱟試劑反應(yīng)物"(LAL-reactivematerial,LAL-RM)的術(shù)語,認(rèn)為除了(1,3)-β-葡聚糖外,還存在著LAL-RM這類物質(zhì)可以激活鱟試劑旁路。LAL-RM的存在是由于在用鱟試劑檢查人工腎血液透析沖洗液中的內(nèi)毒素時(shí)出現(xiàn)呈弱陽性而發(fā)現(xiàn)的。